试管移植(embryotransfer,ET)又称之为精卵结合移殖,别名借腹怀胎。它是将身体或身体之外生产制造的哺乳类动物的初期试管移植到相同的、生理学情况同样的雌虫小动物的子宫内,使之再次长成一切正常个人的生物科技。
下边对于羊的试管移植技术性作简易详细介绍:
羊的试管移植技术性中,给予试管胚胎的奶羊称为肾源(donor),接纳试管胚胎而且代之进行怀孕、孕妇分娩以及喂奶羊羔的称之为蛋白激酶(recipient)。历经试管移植产出率的子孙后代,其遗传信息来源于等位基因彼此,而胚胎发育过程所必须的营养元素则来源于蛋白激酶。可以说,试管移植技术性是试管胚胎生产制造和胚胎发育过程的职责分工与合作。
羊的试管移植技术性步骤关键包含肾源和蛋白激酶母畜的挑选、肾源和蛋白激酶的当期发情期、肾源的超数排卵与交配、试管胚胎的回收利用、品质评定、储存与移殖等阶段(图一)。为了更好地从肾源奶羊获得较多的可以用试管胚胎,必须对肾源奶羊开展超数排卵解决。与此同时,试管移植取得成功是否和肾源与蛋白激酶发情期当期化水平息息相关,故必须人为因素地操纵肾源和蛋白激酶的发情期時间,开展当期化解决。
(一)肾源和蛋白激酶奶羊的挑选
1.肾源奶羊
肾源应是优良品种奶羊,具备较高的繁育使用价值,谱系清晰,遗传能平稳,具备优良的繁育功能和身心健康情况,处在动能正均衡,体况中上等;一般应该有两个或两个之上一切正常的发情周期。经产奶羊应在生殖系统功能恢复过来后才可运用。
2.蛋白激酶奶羊
蛋白激酶奶羊的采用并不考虑到其基因遗传特点,但应该有优良的繁育特性和身心健康情况,体况中上等,一般应该有两个或两个之上的一切正常发情周期,无繁育功能病症和传染性疾病。
(二)当期发情期
选用外源性生殖系统生长激素使一群奶羊在同一阶段内发情期并排卵期的技术性,称之为羊的当期发情期。
(三)肾源超数排卵
在奶羊发情周期的适度時间,注入外源性促性腺素使子宫卵巢比当然发情期时有大量的子宫发育并排卵期的技术性称之为超数排卵,通称超排。
(四)肾源奶羊的交配
为了更好地获得大量的生长发育一切正常的试管胚胎,挑选优质大公羊开展适度交配,也可根据人工受精进行交配。
(五)试管胚胎的回收利用
试管胚胎的回收利用又被称为试管胚胎收集或冲胚,它是运用特殊的水溶液和设备将早期胚胎从奶羊的子宫或双侧输卵管中冲破并回收再利用的全过程。
羊是发情期逐渐后24~30h排卵期,排卵期后三天为16体细胞,排卵期后6~7天囊胚产生(桑椹胚、胚胎),能够依据自身必须的试管胚胎环节估算時间和冲胚位置。
(六)试管胚胎品质评定
试管胚胎的品质评定有很多方式,这儿只对评定试管胚胎最普遍、最好用的组织学法开展详细介绍。
组织学法一般是在30~60倍的体视显微镜下对试管胚胎品质开展鉴定,鉴定的內容包含:①卵细胞是不是授精;②透明带样子、薄厚、有没有损坏等;③卵裂球的高密度水平、卵黄周隙是不是有分散体细胞或体细胞残片、细胞大小是不是有差别;④试管胚胎的生长发育水平是不是与胚龄一致、试管胚胎的清晰度、试管胚胎的由此可见水平是不是详细等。
依据试管胚胎的形状特点将试管胚胎分成A(优)、B(良)、C(中)、和D(劣)4个级别,其分类根据见下表
A级
胚胎发育过程环节与奶羊发情期時间符合;形状详细、外观设计均匀;卵裂球轮廊清楚、尺寸匀称,无小水泡样卵裂球;结构紧凑,体细胞密度大;色彩和清晰度适度,沒有或仅有小量分散的转性体细胞,转性体细胞的占比不超过10%。
B级
胚胎发育过程环节与奶羊发情期時间基本上符合;形状详细、轮廊清楚;体细胞融合稍显疏松,相对密度很大,色彩和清晰度适度,试管胚胎边沿突显小量转性体细胞或小水泡样体细胞,转性体细胞的占比为10%~20%。
C级
发育过程比一切正常缓慢1~2d;轮廊不清楚,卵裂球尺寸不匀称;颜色太明或过暗,体细胞相对密度小;分散体细胞的占比做到20%~50%,体细胞联接疏松;转性体细胞占比为30%~40%。
D级
未精卵结合或生长迟缓2d之上,体细胞团粉碎,转性体细胞的占比超出50%,身亡衰退的试管胚胎。
(七)试管移植
蛋白激酶奶羊应具备显著的发情期病症及其生长发育优良的黄体素,发情期時间应与肾源奶羊一致。这儿关键介绍一下腹腔镜移殖法。
用腹腔镜手术观查蛋白激酶奶羊的子宫卵巢上黄体素的总数与品质,挑选黄体素生长发育优良的蛋白激酶奶羊用以试管移植。子宫卵巢上有一个黄体素的蛋白激酶一般只在该侧子宫移植一枚试管胚胎,有两个或2个之上黄体素者,可酌情考虑移殖两颗或是数枚试管胚胎。
(八)肾源和蛋白激酶手术后的解决和观查
肾源羊冲胚完毕后,皮下注射氯前端烯醇钠以融解黄体素,推动肾源奶羊男性生殖器官的修复。为了更好地避免术后供蛋白激酶奶羊的继发感染,一般要对其注入抗菌素。
羊胚胎移植手术过程,针对手术后的蛋白激酶奶羊要提升喂养管理方法,留意填补一定量的维他命、营养元素,适度限定能量饲料的摄取,防止现象。